2.2樣品采集與制備

樣品采集與預處理:采集蘇州地區和南通地區5家印染企業的污水處理站進水口、二沉池、出水口的水樣。水樣經15℃100W超聲處理10min后,用粗濾紙過濾,取濾液50mL,調節水樣pH6.5~7.0。SPE條件:依次用5mL二氯甲烷和10mL甲醇清洗和活化SPE柱,流速為3.0mL/min;然后水樣以4.0mL/min流速通過SPE柱后,用10mL超純水以4.0mL/min沖洗,依次用10mL乙腈/甲醇(1∶2,V/V)、10mL甲醇洗脫,濃縮至近干后,用甲醇/乙腈(1∶1,V/V)溶解并定容至10mL。

液液萃取條件:在50mL水樣中加入約2.5gNaCl,用50mL丙酮/石油醚(1∶4,V/V)萃取2次,合并萃取液,濃縮至近干后,用甲醇/乙腈(1∶1,V/V)溶解并定容至10mL。

將制備好的樣品過0.22μm微孔濾膜,待UPLC-MS-MS分析。

2.3液質聯用分析條件

超高效液相色譜工作條件:流動相A為乙腈,流動相B為酸化水(2%乙腈,0.2%甲酸,0.005 mol/L甲酸銨,pH2.7),梯度洗脫條件見表1。流速0.200mL/min,進樣量10μL。

ESI-MS/MS工作條件:電噴霧正離子,毛細管電壓:3.5kV;萃取器:3.0 V;離子源溫度:110℃;錐孔反吹氣流量:50L/h;脫溶劑氣流量:500L/h;脫溶劑氣溫度:380℃;碰撞氣流量(Ar):0.19mL/min;碰撞池壓力:0.33Pa;光電倍增器電壓:650V。采用MRM多反應監測。

3結果與討論3.1質譜分析條件優化

由于致敏性分散染料含有易于和H+結合的帶有孤對電子的N或O原子,選擇ESI(+)作為電離模式。采用三通閥自動進樣方式,分別對9種致敏性分散染料的標準溶液(5mg/L)進行一級質譜全掃描(Fullscan),確定各種染料的準分子離子,并分別優化其錐孔電壓(Conevoltage,CV);然后分別以其準分子離子為母離子,通過氬氣碰撞產生碎片離子進行二級質譜掃描(Daughterscan)。選擇豐度較高的碎片離子作為定性與定量特征離子,優化碰撞能量(Collisionenergy,CE),提高檢測的靈敏度。結合保留時間和一級、二級質譜信息進行染料的定性分析。選用豐度最高的子離子作為定量離子。9種致敏性分散染料的定性與定量特征離子及優化的質譜分析參數見表2。

表2 9種致敏性分散染料的保留時間和優化的質譜分析參數

3.2液相色譜分析條件的選擇

本實驗選用C18反相柱,以酸性體系為流動相,考察了流動相極性、pH值、緩沖鹽體系、流速對分離效能和響應值的影響(表3)